DE1817636A1

DE1817636A1 - Frontal chromatographic sepn and isomerization of humulone - isomerization of humulone

Info

Publication number: DE1817636A1
Application number: DE19681817636
Authority: DE
Inventors: Westermann Donald H; Tommy Nakayama
Original assignee: Miller Brewing Co
Current assignee: Miller Brewing Co
Priority date: 1968-12-23
Filing date: 1968-12-23
Publication date: 1970-06-25

Abstract

Process for the separation and production of homolone complex comprises production of hop extract with aid of hydrocarbon as solvent, hop extract serving as elutriant and containing material to be separated, preparing column with inert alkaline grainy adsorption material, preferably calcium silicate, magnesium silicate or basic aluminium oxide or mixture of calcium oxide and diatomite, with affinity to humulone and repelling lupolone; applying hop extract continuously to column with a speed dependent on dimensions of column and concentration of extract to obtain frontal chromatographic separation and retaining largest part of humulone at adsorption material before extract leaves column, and using extract as elutriant, until capacity of column is exhausted, collecting lupolone, waxes and other components in discharge, and removing solvent.

Description

Frontale ohromatographische Trennung und Isomerisierung von Humulon Diese Erfindung betrifft Verbesserungen bei der frontalen chromatographischen Trennung und Isomerisierung von Humulon.Frontal ohromatographic separation and isomerization of humulone This invention relates to improvements in frontal chromatographic separation and isomerization of humulone.

Der Anteil an Bitterkeit und Aroma, der dem Bier durch Hopfen verliehen wird, ist in der Brauerei-Industrie bekannt. Humulon oder α -Säure von Hopfen, das im Braukessel zugesetzt wird, und sich nachfolgend zu den besser löslichen bittren Isohumulon-Verbindungen isomerisiert, ist während der letzten 20 Jahre der Gegenstand ausgedehnter Untersuchungen gewesen.The proportion of bitterness and aroma given to beer by hops is known in the brewing industry. Humulone or α-acid from hops, which is added in the brewing kettle, and subsequently to the more soluble bitter ones Isohumulone compounds isomerized has been the subject for the past 20 years extensive investigations.

Die Brauer haben festgestellt, dass im normalen Brauverfahren 70 - 80 % des Humulons isomerisiert werden und dass nur 20 -35 % des dem Brauverfahren zugesetzten Humulons als Isohumulon im Endprodukt auftreten. Der charakteristische Verlust an Humulon während des Verfahrens, die nachfolgende Isomerisierung im Braukessel und das gleichzeitige Ausfällen und der Abbau sind gründlich untersucht worden. Es sind zahlreiche Versuche gemacht worden, die Verwertbarkeit von α Säuren im Brauterfahren zu erhöhen, die aber nur begrenzten Errolg hatten.The brewers have found that in the normal brewing process 70 - 80% of the humulone is isomerized and that only 20 -35% of the brewing process added humulone appear as isohumulone in the end product. The characteristic Loss of humulone during the process, the subsequent isomerization in the Brew kettles and the simultaneous precipitation and degradation are thoroughly investigated been. Numerous attempts have been made to determine the usability of α To increase acids in the brewing experience, but had limited success.

Es ist bisher eine Vielzahl von Verfahren zur Isolierung von α -Säure (Humulon) und ß-Säuren (Lupulon) vorgeschlagen worden, wobei die letzteren im Bier wegen ihrer begrenzten Lös lichkeit nicht erwUnsoht sind. Während einige dieser Verfahren eine chromatographische Trennung von Hopfenextrakten einschliessen, offenbart die vorliegende Erfindung eine davon völlig verschiedene Methode und Technik der ohromatographischen Trennung, die relativ einfach ist und eine beinahe 100 %ige Ausbeute an Isohumulon-Verbindungen aus den Humulonen in den Hopfen liefert und die eine sehr wirksame neuartige Abtrennung der Humulone aus dem gesamten Hopfenextrakt durch eine "frontale" chromatographische Arbeitsweise umfasst, die im folgenden im einzelnen erläutert werden wird.So far there has been a variety of methods for isolating α -Acid (humulone) and ß-acids (lupulone) have been suggested, the latter being the latter are not recommended in beer because of their limited solubility. While some these procedures include a chromatographic separation of hop extracts, the present invention discloses a method and technique entirely different therefrom the ohromatographic separation, which is relatively simple and almost 100% Yield of isohumulone compounds from the humulones in the hops provides and which is a very effective new type of separation of humulones from the entire hop extract encompassed by a "frontal" chromatographic procedure, which follows will be explained in detail.

Ehe die von anderen Forschern der Brauindustrie angewandten Arbeitsmethoden erläutert werden, er#cheint es ratsam, die Terminologie speziell in bezug auf Methoden der Säulenchromatographie zu definieren.Before the working methods used by other researchers in the brewing industry As explained, it is advisable to use the terminology specifically in relation to methods to define column chromatography.

Chromatographie ist ein Verfahren zum Trennen von chemischen Bestandteilen auf dem Adsorbens aufgrund ihrer Adsorptionseigenschaften. In der Adsorptionschromatographie wird eine einzelne Probe, die das ZU trennende Gemisch enthält, auf eine Seite eines Teiles der Adsorptionssäule gegeben. Das Gemisch uird mit einer beweglichen fltlssigen Phase durch das Adsorbens gespult und die selektiven Sorptionskräfte, von denen die Trennung des Gemisches abhängt, trennen die Bestandteile im mehrstufigen Gegenstromverfahren durch: das Adsorbens. Durch fortgesetztes Waschen erhält man aus der Säule die Eluate, die die abgetrennten Bestandteile enthalten.Chromatography is a process used to separate chemical components on the adsorbent due to their adsorption properties. In adsorption chromatography a single sample containing the mixture to be separated is transferred to one side of one Part of the adsorption column given. The mixture is mixed with a moving liquid Phase flushed through the adsorbent and the selective sorption of which the separation of the mixture depends, separate the constituents in a multistage countercurrent process by: the adsorbent. Continued washing gives the eluates from the column, which contain the separated components.

Bei der Verteilungschromatographie wird, im allgemeinen vor der physikalischen Aufbereitung des Bettes, eine hydrophile Flüssigkeit auf das Adsorptionsmittel gegeben. Die einzelne Probe, die auf das Ada6bens gebracht wurde, wird dann mit einem lipophilen Lösungsmittel ausgewaschen oder entwickelt.In partition chromatography, in general, before physical Preparation of the bed, a hydrophilic liquid is added to the adsorbent. The individual sample that has been applied to the adhesive is then treated with a lipophilic Solvent washed out or developed.

Die Trennung der Bestandteile der Probe des Gemisches ist abhiingig von der Flüssig-Flüssig-Verteilung der Bestandteile oder von dem sög. Verteilungskoeffizienten.The separation of the components of the sample of the mixture is dependent of the liquid-liquid distribution of the components or of the sög. Distribution coefficient.

Bei der Verfahren der umgekehrten Verteilungschromatographie werden die flüssigen Phasen der Verteilungssäule physikalisch umgekehrt. Das lipophile Lösungsmittel wird auf das Adsorbens gegeben und die eluierende Phase ist hydrophil. Wiederum ist die Trennung eine Funktion des Flüssig-Flüssig-Verteilungskoeffizienten der Komponenten in der ursprünglichen Probe des Gemisches.When using the reverse partition chromatography method the liquid phases of the distribution column are physically reversed. The lipophilic Solvent is added to the adsorbent and the eluting phase is hydrophilic. Again, the separation is a function of the liquid-liquid partition coefficient of the components in the original sample of the mixture.

Die Ionenaustausch-Chromatographie umfasst den Ersatz des Adsorptionsmittels durch ein Ionenaustauscher-Harz. Die Trennung der Bestandteile der Probe ist abhängig von den Gleichgewichtsbedingungen zwischen den nicht-ionisierten Komponenten, den ionisierten Komponenten, dem "Austauscher"-Harz und der Molekularadsorption. Die Elution der Säule erfolgt durch Hinzufügen einer Lösung,die ein Ion enthält, das bevorzugt ausgetauscht wird oder durch Erhöhung des Konzentrationsgradienten im Adsorbens mit Hilfe anderer Ionen.Ion exchange chromatography involves replacing the adsorbent through an ion exchange resin. The separation of the components of the sample is dependent on the equilibrium conditions between the non-ionized components, the ionized components, the "exchanger" resin and molecular adsorption. the Elution of the column is carried out by adding a solution containing an ion that is preferably exchanged or by increasing the concentration gradient im Adsorbent with the help of other ions.

Bei den beschriebenen Elutionsverfahren wird die Probe des Gemisches als eine einzelne Probe zugegeben und das Elutionsmittel entnält kein Probenmaterial.In the elution process described, the sample of the mixture added as a single sample and the eluent does not remove any sample material.

Bei der Entwicklung einer einzelnen Probe auf der Adsorptionssäule hat das Entwicklungs- oder Elutionsmittel, das auf die Säule gegeben wird, häufig eine bestimmte Zusammensetzung.When developing a single sample on the adsorption column the developing or eluant that is added to the column has frequent a certain composition.

Wenn die Bestandteile auf der Säule zu stark adsorbiert sind, wird es notwendig, die Zusammensetzung des Elutionsmittels zu verändern, um die gewünschten Bestandteile zu desorbieren, indem ein Mittel variabler Zusammensetzung, z.B. pH, Verhältnis des Lösungsmittels, Salzkonzenttatlon usw., benutzt wird. Man nennt dies Gradientenelution.If the components are too strongly adsorbed on the column, will it is necessary to adjust the composition of the eluent too change, to desorb the desired constituents by using an agent of variable composition, e.g., pH, ratio of solvent, salt concentration, etc. is used. Man calls this gradient elution.

Bayaert und Cornand ( Congres International des Industreb de Fermentation, Conferences et Communications 64; 236-78, Gent, Belgien, 1947 ) untersuchten die Anwendung chromatographischer Verfahren bei der Trennung von α- und ß-Säuren aus Hopfen mit dem Zeil, die α- und ß-Säuren zur weiteren analytischen Auswertung zu reinigen. Es wurde Silicagel verwendet, wobei die Art des Silicagels sich als sehr entscheidend erwies.Bayaert and Cornand (Congres International des Industreb de Fermentation, Conferences et Communications 64; 236-78, Gent, Belgium, 1947) examined the Use of chromatographic methods in the separation of α- and ß-acids from hops with the Zeil, the α- and ß-acids for further analytical evaluation to clean. Silica gel was used, the type of silica gel being found to be proved very crucial.

Es wurde keine saubere Trennung des Gemisches von α und ß-Säuren erhalten.There was no clear separation of the mixture of α and β acids obtain.

Das Verfahren von Bayaert und Cornand wurde von Govaert und Verzele, M., ( ibid., 64; 279-96, 1947 ), ausgeweitet. Die ot-Säure wurde durch Fällung mit Blei und die ß-Säure durch po tentiome trische Titration bestimmt.The method of Bayaert and Cornand was followed by Govaert and Verzele, M., (ibid., 64; 279-96, 1947) expanded. The ot-acid was obtained by precipitation with Lead and the ß-acid determined by potentiometric titration.

Lundin, H. ( Wallerstein Laboratories Communications, 10; 231, 1947 ) schlug ein Verfahren der Analysa der Bittersäuren der Hopfen in äthanolischer Lösung durch chromatographische Adsorption der äthanolischen Lösung vor. Die CX:- und Säuren wurden nicht getrennt.Lundin, H. (Wallerstein Laboratories Communications, 10; 231, 1947 ) proposed a method of analysa of the bitter acids of the hops in ethanolic Solution by chromatographic adsorption of the ethanolic solution. The CX: - and acids were not separated.

Das Verfahren von Govaert und Verzele wurde von Rigby und Bethune, J0L.> ( American Society of Brewing Chemists Proceedings, S. 1, 1950 ) weiter ausgebaut, aber es erfolgte keine Trennung von Humulonen und Lupulonen. Der Zweck der chromatographischen Trennung ging dahin, fUr die spektralphotometrische Analyse die optisch störenden Substanzen bestimmter Wellenlängen zu entfernen.The method of Govaert and Verzele was followed by Rigby and Bethune, J0L.> (American Society of Brewing Chemists Proceedings, p. 1, 1950) on expanded, but there was no separation of humulones and lupulones. The purpose the chromatographic separation went to the spectrophotometric analysis to remove the optically disruptive substances of certain wavelengths.

Das Verfahren von Govaert und Verzele wurde von E. Schild und W. Riedl ( Brauwissenschaft, S. 81-87, 1952 ) ausgebaut, so dass es die Trennung von α- und Säuren und der gesamten weichen Harze umfasste.The Govaert and Verzele method was used by E. Schild and W. Riedl (Brewing Science, pp. 81-87, 1952) expanded so that it the separation of alpha and acids and all of the soft resins.

Aus dem gesamten Hopfenextrakt wurden die Humulone und die Lupulone von Alderton u.a. ( Analytical Chemistry, 26; 983, 1954)! unter Anwendung des Verfahrens von Bayaert und Cornand entfernt, wobei anstelle von Benzol Äthylendichlorid zur Engwicklung der Säule verwendet wurde. Es wurde eine erhöhte Stabilität der Säuren in Äthylendichlorid als Lösungsmittel erreicht.The humulones and lupulones were made from the entire hop extract von Alderton et al. (Analytical Chemistry, 26; 983, 1954)! using the procedure von Bayaert and Cornand removed, with ethylene dichloride instead of benzene for Engaging the column was used. There was an increased stability of the acids reached in ethylene dichloride as a solvent.

Auf einem Anionenaustausch-Harz wurden Humulone und Lupulone aus einem methanolischen Hopfenextrakt getrennt, wobei zum Eluieren verschieden stark saure wässrige methanolische Lösungen verwendet wurden.On an anion exchange resin, humulones and lupulones became one methanolic hop extract separated, with different degrees of acidic strength for the elution aqueous methanolic solutions were used.

Nach Govaert und Verzele wurde nur ein einzelnes Lösungsmittelsystem, nämlich Benzol, verwendet, um den Hufen zu extrahieren und den Extrakt auf einer Silicagel-Säule zu entwickeln und so die c und ß-Säuren zu isolieren, die gemeinsam eluiert wurden. Der "Humulon-Komplex" nach Verzele und Govaert ( ibid., 18; 181, 1955 ) wurde aus einem Extrakt der Hopfen in Isooctan auf eine Silicagel-Säule durch Verteilungschromatographie isoliert, wobei eine alkalisch gepufferte ( pH 9,05 ) methanolische Lösung als stationäre Phase und Isooctan als bewegliche Phase dienten. Die Instabilität des Humulons im System/wie folgt betont: '" Es könnte dies auch im stärker alkalischen Bereich erfolgen, aber es muss wegen der erhöhten Instabilität des Humulons bei erhöhter Alkalität vermieden werden." Der Schwerpunkt lag bei der Notwendigkeit der richtigen Herstellung von Silicagel, die bereits erwähnt wurde.According to Govaert and Verzele, only a single solvent system was used, namely benzene, used to extract the hooves and put the extract on one Develop silica gel column and thus isolate the c and ß acids that are common were eluted. The "humulone complex" according to Verzele and Govaert (ibid., 18; 181, 1955) was made from an extract of the hops in isooctane on a silica gel column Partition chromatography isolated, using an alkaline buffered (pH 9.05) methanolic solution served as the stationary phase and isooctane as the mobile phase. The instability of humulone in the system / emphasized as follows: '"It could be this too in the more alkaline range, but it has to be done because of the increased instability of humulone can be avoided with increased alkalinity. "The focus was on the Need for the correct manufacture of silica gel, which has already been mentioned.

Von Cook et al ( Journal of the Institute of Breeving, 62; 220, 1956 ) wurden Humulinon und Cohumulinon auf einer Silicagel-Säule isomerisiert. Dieses Phänomen erklärt den hohen Schmelzpunkt eines Produktes, das von Verzele und Govaert erhalten wurde und für Adhumulinon gehalten wurde, das sich aber in Wirklichkeit als Isomeres des Adhumulinons erwies.From Cook et al (Journal of the Institute of Breeving, 62; 220, 1956 ) humulinone and cohumulinone were isomerized on a silica gel column. This Phenomenon explains the high melting point of a product made by Verzele and Govaert and was taken to be adhumulinone, but in reality it was proved to be an isomer of adhumulinone.

Spetsig und M.J. Steninger ( Journal of the Institute of Brewing, 62; 333, 1956 ) isolierten auf einer Säule aus Diatomeen; erde Gemische aus Cohumulon, Humulon und Adhumulon, wobei sie Tetrachlorkohlenstoff als stationäre Phase und Methanol als bewegliche Phase verwendeten.Spetsig and M.J. Steninger (Journal of the Institute of Brewing, 62; 333, 1956) isolated on a column of diatoms; earth mixtures of cohumulone, Humulon and Adhumulon, using carbon tetrachloride as the stationary phase and Used methanol as the mobile phase.

Nach dem Verfahren von Gough ( ibid., 62; 9, 1956 ) fUhrte M.Following the procedure of Gough (ibid., 62; 9, 1956), M.

Verzele ( Wallerstein Laboratories Communications 68; 7, 1957) eine Ätherextraktion des Hopfens in Gegenwart von S02 zur Reinigung des Extraktes auf einer Säule aus Aktivkohle durch. Das Eluat wurde polarimetrisch auf oC-Säuren untersucht.Verzele (Wallerstein Laboratories Communications 68; 7, 1957) a Ether extraction of the hops in the presence of SO2 to purify the extract a column of activated carbon. The eluate was examined polarimetrically for oC acids.

Das Trennungsverfahren von Verzele wurde von Bausi et al ( Die Nahrung, 3, Nr. 5/6; 501-514, 1959 ) modifiziert, indem Äthylacetat zur Elution der Säule aus Aktivkohle verwendet wird, die einen mit S02 gesättigten Ätherextrakt enthält.The separation process of Verzele was described by Bausi et al (The food, 3, No. 5/6; 501-514, 1959) modified by adding ethyl acetate to elute the column made of activated charcoal, which contains an ether extract saturated with SO2.

Spetsig et al ( European Brewery Convention Proceeding ofthe 6th Congress, Copenhagen, 1957, 8. 22 ) hat sein ursprüngliches Verfahren zur Verteilungstechnik der Isolierung von Bitterstoffen dahingehend modifiziert, dass er Chloroform mit Gradientenelution ( pH 3 - 11 ) mit wässrigem, gepuffertem Methanol verwendet.Spetsig et al (European Brewery Convention Proceeding of the 6th Congress, Copenhagen, 1957, 8. 22) has its original method of distribution technology the isolation of bitter substances modified in such a way that it contains chloroform Gradient elution (pH 3-11) with aqueous, buffered methanol used.

Howard, G.A. und Slater, C.A. ( Journal of the Institute of Brewing, 66; 305, 1960 ) verwendeten ein basisches Ionenaustauscherharz zur Isolierung der oC-Säuren aus einem methanolischen Hopfenextrakt. Die isolierten Humulone wurden danach isomerisiert und ungehopftem Bier zugesetzt.Howard, G.A. and Slater, C.A. (Journal of the Institute of Brewing, 66; 305, 1960) used a basic ion exchange resin to isolate the oC acids from a methanolic hop extract. The isolated humulones were then isomerized and added to unhopped beer.

Spetsig, L.O. ( European Brewery Convention Proceedings of the 6th Conbress, Copenhagen, 1961, Sk. 134 ) modifizierte sein ursprüngliches Verteilungsverfahren, indem er die Abmessungen der Säule veränderte und die Diatomeenerde durch Trocknen in einem Exsikkator über Dichlordimethy llan präparierte. Das präparierte Pulver wurde im Elutionsmittel suspendiert und in bezug auf Chloroform gesättigt. Hopfen wurden mit Chloroform extrahiert und der Extrakt zusammen mit einem geringen Anteil des ersten Elutionsmittels auf die Säule gegeben. Die weitere Elution zur Isolierung der OC, und ß-Säuren wurde mit 25 %igem Methanol von steigendem pH-Gradienten durchgeführt.Spetsig, L.O. (European Brewery Convention Proceedings of the 6th Conbress, Copenhagen, 1961, Sk. 134) modified his original distribution method, by changing the dimensions of the column and the diatomaceous earth by drying Prepared in a desiccator over dichlorodimethy llan. The prepared powder was suspended in the eluent and in with respect to chloroform saturated. Hops were extracted with chloroform and the extract together with added a small amount of the first eluent to the column. The other Elution to isolate the OC, and ß-acids was increasing with 25% methanol pH gradients carried out.

Die Bestandteile des Hopfens wurden von Hartl und Kleber, W.The constituents of the hops were discovered by Hartl and Kleber, W.

( ibid., 1961, S. 139 ) auf einer Polyamidsäule getrennt, unter Verwendung von Wasser, Methanol und Phosphatpuffern.(ibid., 1961, p. 139) on a polyamide column using of water, methanol and phosphate buffers.

Säulen aus Dowex 1-X4 - Anlonenaustauscher-Harz ( Acetatform ) wurden zum Trennen von Isohumulon, Isocohumulon, Lupulon, Colupulon, Humulon und Cohumulon aus partiell isomerisierten äthanolischen Hopfenextrakten nach Simmons, D .H. und Wilson, Pan. L., ( Journal of the Institute of Brewing, 68; 495, 1962) verwendet.Columns made from Dowex 1-X4 - anion exchange resin (acetate form) were made for separating Isohumulon, Isocohumulon, Lupulon, Colupulon, Humulon and Cohumulon from partially isomerized ethanolic hop extracts according to Simmons, D .H. and Wilson, Pan. L., (Journal of the Institute of Brewing, 68; 495, 1962) used.

Die in Hexan löslichen Bestandteile des Bieres, Säuren, α-Säuren, die Oxydationsprodukte der α - und ß-Säuren und die gesamten weichen Harze von alten Hopfen, wurden von Kuroiwa und Hashimoto, H. ( Report of the Research Laboratories of Kirin Brewery Co., Ltd., Nr. 6; 12-26, 1963 ) der Säulenchromatographie unterworfen. Die Silicagelsäu#e wurde in einem Gemisch von n-Hexan-Athylacetat im Verhältnis 15 : 1 hergestellt.The components of beer that are soluble in hexane, acids, α-acids, the oxidation products of the α and β acids and all of the soft resins of old hops, have been reviewed by Kuroiwa and Hashimoto, H. (Report of the Research Laboratories of Kirin Brewery Co., Ltd., No. 6; 12-26, 1963) of column chromatography subject. The silica gel column was in a mixture of n-hexane-ethyl acetate in Ratio 15: 1 made.

Die Elution mit diesen Lösungsmitteln mit den Verhältnissen 15 :l, 3 : 1 und 1 : 1 erfolgte mit steigendem Gradienten.The elution with these solvents with the ratios 15: 1, 3: 1 and 1: 1 took place with increasing gradients.

Auf die Säule wurden Proben mit einem geeigneten Lösungsmittel-Verhältnis gegeben, in dem die Probe löslich war.Samples with an appropriate solvent ratio were applied to the column given in which the sample was soluble.

Mit Hilfe eines Chromatostrip-Verfahrens wurden von Sasahara, T. ( Report of the Research Laboratories of Kirin Brewery Co., Ltd., Nr. 7; 35 - 41, 1964 ) wurden weiche ß-Harze getrennt, entfernt und in wässrigen und in wässrig-alkalischen Lösungen gekocht. Diese Produkte wurden auf einer Silicagel-Säule chromatographiert, mit einem normalen Hexan-Ä thylace tat-System im Verhältnis von 15 : 1, 3 : 1 und 1 : 1 chromatographiert, in Abhängigkeit von der Löslichkeit der Probe. Die Entwicklung der Säule erforderte 8 bis 9 Stunden.Using a chromatostrip method, Sasahara, T. ( Report of the Research Laboratories of Kirin Brewery Co., Ltd., No. 7; 35 - 41, 1964) soft ß-resins were separated, removed and divided into aqueous and aqueous-alkaline Solutions cooked. These products were chromatographed on a silica gel column, with a normal hexane-ethyl acetate system in the ratio of 15: 1, 3: 1 and Chromatographed 1: 1, depending on the solubility of the sample. The development the Column required 8 to 9 hours.

Es ist ein allgemeines Ziel der vorliegenden Erfindung, für die Trennung der Hopfenbestandteile ein ohromatographisches Verfahren zu entwickeln, das eine frontale Arbeitsweise einschliesst, wobei sich das Verfahren von den nächstliegenden Verfahren der bisherigen Technik durch die Tatsache unter scheidet, dass der ganze Extrakt auf die Chrorntographiesäule gegeben wird, sö dass alles, was der Säule zugeführt wird, die zu trennenden Stoffe enthält und bei dem die getrennten Bestandteile auf dem Adsorbens für die weitere Verwendung festgehalten werden.It is a general aim of the present invention for separation of the hops constituents to develop an ohromatographic process that is a frontal working method includes, whereby the procedure differs from the closest Prior art method differs by the fact that the whole Extract is placed on the chromatography column, so that everything in the column is supplied, which contains the substances to be separated and in which the separated components be held on the adsorbent for further use.

Es ist ein weiteres Ziel der Erfindung, ein verbessertes Verfahren zur Trennung des Humulon-Komplexes aus dem gesamten Hopfenextrakt zu entwickeln, wobei das adsorbierende Material in der Säule ein körniges alkalisches Mittel, wie z.B. natürliches oder synthetisches Calciumsilikat darstellt. Diese Adsorbentien sind billig, inert und verwendbar bei der Herstellung von Nahrungsmitteln. Die Adsorbentien haben auch eine hohe Adsorptionskapazität für Humulon und erlauben hohe Fliessgeschwindigkeiten.It is another object of the invention to provide an improved method to separate the humulone complex from the entire hop extract, wherein the adsorbent material in the column is a granular alkaline agent such as e.g. represents natural or synthetic calcium silicate. These adsorbents are cheap, inert, and useful in the manufacture of food. The adsorbents also have a high adsorption capacity for humulone and allow high flow rates.

Es ist ein weiteres Ziel der Erfindung, einverbessertes Verfahren zur Trennung von Humulon aus dem ganzen Hopfenextrakt, wie oben beschrieben, zu entwickeln, das die Anwendung einer frontalen chromatographischen Technik zusammen mit der Anwendung von Energie, wie z.B. der angewendeten latenten Verdampfungswärme des Wasserdampfes oder der Mikrowellen zur Durchführung der Isomerisierung, umfasst. Wird Wasserdampf angewendet, so verläuft der Isomerisierungsprozess des Humulons auf dem Adsorbens gleichzeitig mit der Entfernung des Lösungsmittels mit Wasserdampf. Die anfängliche latente Verdampfungswärme des Wasserdampfes dient dazu, das Lösungsmittel aus dem Adsebens zu entfernen, und der kondensierte Wasserdampf liefert das Wasser, das zur Isomerisierung des Humulons erfor4erlich ist. In diesem Verfahren wird ein erheblicher Anteil Energie gespart, da es nicht notwendig ist, grosse Mengen Lösungsmittel aus einer verdünnten Extraktlösung zu entfernen, wie es in einer Anzahl von Verfahren der bisherigen Technik erforderlich ist.It is another object of the invention to provide an improved method for the separation of humulone from the whole hop extract, as described above develop the application of a frontal chromatographic technique together with the application of energy, such as the applied latent heat of vaporization of the steam or the microwaves to carry out the isomerization. If steam is used, the isomerization process of the humulone takes place on the adsorbent simultaneously with the removal of the solvent with steam. The initial latent heat of vaporization of the water vapor serves to remove the solvent to remove from the Adsebens, and the condensed water vapor supplies the water, that is necessary for the isomerization of humulone is. In this Process, a considerable amount of energy is saved, since it is not necessary remove large amounts of solvent from a dilute extract solution, such as it is required in a number of prior art processes.

Es ist ein weiteres Ziel der Erfindung, ein Verfahren zu entwickeln, wie es oben beschrieben ist, das eine hohe Ausbeute an Isohumulonen aus den Humulonen erzielt und das als Nebenprodukt Lupulon, Wachse und andere unwesentliche Bestandteile liefert.It is a further object of the invention to develop a method as described above, that is a high yield of isohumulones from the humulones achieved and that as a by-product lupulone, waxes and other insignificant ingredients supplies.

Es ist ein weiteres Ziel der Erfindung, ein Verfahren zu entwickeln, wie oben beschrieben, bei dem die α-Säure entweder als Humulon oder als Isohumulon auf dem Adsorbens für die weitere Verwendung festgehalten wird; bei dem die Adsorptionsmaterialien eine überaus hohe Retention für Humulon und eine geringe Retention für Lupulon zeigt; und bei dem die Ads-fptionskapazität des Füllmaterials der Säule für-Säuren dreimal so gross ist wie diejenige, die in der bisherigen Technik bei der Anwendung von Anionenaustauscher-Harzen erreicht wurde wobei diese Harze im Vergleich zu dem in der vorliegenden Erfindung verwendeten Material sehr teuer sind; bei dem die Fliessgeschwindigkeiten durch die Säule sehr viel höher sind als diejenigen von chromatographischen Verfahren, die bisher auf Hopfenbestandteile angewandt wurden; bei denen Lupulon und die unwesentlichen Bestandteile aus der Säule leicht eluiert werden können, im Vergleichtzur Anwendung der Gradientenelution in der bisherigen Technik; bei dem dieStabilität des Humulons oder Isohumulons auf dem Adsorbens ausgezeichnet ist, sodass es möglich ist, Material zur späteren kommerziellen , Verwendung herzustellen, ohne dass bei der-Lagerung eine Wert; minderung ( Abbau ) eintritt; bei dem das Adsorbens ein inertes Materials ist, das dem Brauvorgang während des Verfahrens einfactti zugesetzt werden kann.It is a further object of the invention to develop a method as described above, in which the α-acid is either as humulone or as isohumulone is retained on the adsorbent for further use; in which the adsorbent materials exhibits exceedingly high retention for humulone and low retention for lupulone; and in which the adsorption capacity of the packing material of the column for acids is three times is as large as that used in the previous technology when applying Anion exchange resins was achieved with these resins compared to that in materials used in the present invention are very expensive; at which the flow velocities through the column are much higher than those of chromatographic methods, which have been applied to hops components so far; where Lupulon and the insubstantial Components can be easily eluted from the column when compared to application the gradient elution in the prior art; in which the stability of the humulone or isohumulons on the adsorbent is excellent so that it is possible to material for later commercial use without the need for storage a value; reduction (dismantling) occurs; in which the adsorbent is an inert material that can be easily added to the brewing process during the process.

Es ist ein weiteres Ziel der Erfindung, ein neuartiges Verfahren zu entwickeln, bei dem der Humulon-Komplex, entweder mit oder ohne vorherige Isomerisierung, bequem verwendet werden kann, wenn er sich auf dem Adsorptionsmaterial befindet, indem z.B. das Adsorptionsmaterial, das den Humulon-Komplex trägt, beim Brauverfahren der heissen Kürze zugesetzt wird, entweder im "Nach-Kessel" ( WUz>zepfanne ) oder einer früheren Sture, und bei dem die Isomerisierung gegebenenfalls in der heissen Kürze erfolgen kann.It is another object of the invention to provide a novel method develop in which the humulone complex, either with or without prior isomerization, can be conveniently used when it is on the adsorbent material, by, for example, the adsorption material that carries the humulone complex in the brewing process the hot shortness is added, either in the "after-boiler" (WUz> zepfanne) or an earlier sture, and in which the isomerization optionally in the hot brevity can be done.

Wie aus den oben beschriebenen und weiteren Zielen ersichtlich ist, betrifft die Erfindung ein verbessertes Verfahren zur Trennung und Isomerisierung von Humulon zur Anwendung und alle seine Stufen und Kombinationen, wie in den Ansprüchen offenbart ist, und alle entsprechenden Verfahren.As can be seen from the objectives described above and others, the invention relates to an improved process for separation and isomerization of humulone for application and all its stages and combinations as in the claims and all related procedures.

In der beiliegenden Zeichnung wird ein Schema dargestellt, das das chromatographische Verfahren erläutert und eine Anzahl von verschiedenen Arbeitsweisen zur Handhabung und/oder Isomerisierung des getrennten Humulons aufzeigt.The accompanying drawing shows a schematic that shows the chromatographic procedures are explained and a number of different working methods for handling and / or isomerization of the separated humulone.

Abschnitt I Chromatographische Trennung Ein neuartiges Merkmal des verbesserten Verfahrens ist die Trennung des Humulon-Komplexes und des Lupulon-Komplexes der Hopfen voneinander durch das frontale chromatographische Elutionstrennverfahren zu dem Zweck, den Humulon-Komplex in möglichst reiner Form zu erhalten, Bupulon zusammen mit Wachsen und anderen unwesentlichen Bestandteilen mit dem Auslauf zu entfernen und den Humulon-Komplex zur weiteren Verwendung an ein inertes alkalisohes körniges Adsrobens eines speziellen Typs gebunden zu erhaltene das keine Auswirkungen auf Nahrungsmittel, wie Bier, zeigt.Section I Chromatographic Separation A novel feature of the The improved method is the separation of the humulone complex and the lupulone complex the hops from each other by the frontal chromatographic elution separation method for the purpose of keeping the humulone complex in as pure a form as possible, bupulon along with waxes and other non-essential ingredients with the spout too remove and transfer the humulone complex to an inert alkaline substance for further use granular adsorbent of a special type bound to get that no effect points to foods such as beer.

In der schematischen Darstellung besteht das zugeführte Material vorzugsweise aus einem Hexanextrakt von Hopfen mit einer Konzentration von nahezu 4 ffi gelösten Feststoffen, der zur Entfernung der unwesentlichen unlöslichen Feststoffe filtriert worden list. Es können auch andere Kohlenwasserstoffe als Lösungsmittel dienen, wenn auch die Verwendung von Hexan bevorzugt ist. Ebenso kann Hexan mit einem geringen Prozentsatz XeSanol oder Hexan mit einem geringen Prozentsatz Aceton verwendet werden. Ausserdem können andere aliphatische Kohlenwasserstoffe, wie z.B. Pentan, Hexan, Heptan, Octan oder Isooctan verwendet werden. Ebenso können chlorierte Kohlenwasserstoffe, wie Chloroform, Tetrachlorkohlenstoff, Dichlormethan, Dichloräthan, Trichloräthan und Tetrachloräthan verwendet werden. Es können auch aromatisohe Lösungsmittel wie Toluol, Benzol oder Xylol verwendet werden, wobei dafilr Sorge' zu tragen ist, dass diese Lösungsmittel aus dem Endprodukt entfernt werden.In the schematic representation, the material supplied preferably consists dissolved from a hexane extract of hops with a concentration of almost 4 ffi Solids Filtering to remove the negligible insoluble solids been cunning. Other hydrocarbons can also serve as solvents, although the use of hexane is preferred. Likewise, hexane can with a low Percentage XeSanol or hexane with a low percentage acetone can be used. In addition, other aliphatic hydrocarbons such as pentane, hexane, Heptane, octane or isooctane can be used. Chlorinated hydrocarbons, such as chloroform, carbon tetrachloride, dichloromethane, dichloroethane, trichloroethane and tetrachloroethane can be used. It can also aromatic solvents such as Toluene, benzene or xylene can be used, care being taken to ensure that these solvents are removed from the final product.

Der Extrakt kann aus einem geeigneten Behälter 10 durch eine Leitung 11 reguliert lurch ein Ventil 12 in die chromatographische Säule 13 geleitet werden. Die in diesem Verfahren benutzte chromatographische Säule hatte einen Innendurchmesser von 20 mm und der Behälter 10 hatte ein Fassungsvermögen von 250 mm. Die benutzte Chromatographie-Säule 13 war Nr.The extract can be taken from a suitable container 10 through a conduit 11 regulated by a valve 12 are passed into the chromatographic column 13. The chromatographic column used in this procedure had an internal diameter of 20 mm and the container 10 had a capacity of 250 mm. The used Chromatography column 13 was No.

2-K-42225, hergestellt von Kontes Glass Company of Vineland, New Jersey.2-K-42225 made by the Kontes Glass Company of Vineland, New Jersey.

Die Säule 13 wurde vor der Benutzung mit Hexan gefüllt. Danach wurde entsprechend den in den folgenden Beispielen angegebenen Mengen, vorzugsweise bis zu etwa 20 g, langsam Adsorbens in die Säule gefüllt, so dass sich das Adsorbens absetzen konnte.The column 13 was filled with hexane before use. After that it was according to the amounts given in the following examples, preferably up to to about 20 g, slowly filled adsorbent into the column, so that the adsorbent could drop.

Das Adsorptionsmittel muss ein inertes, alkalisches, körniges Material sein, das dazu neigt, Bupulon abzuweisen und das eine hohe Affinität zum Humulon und keine Auswirkung auf Bier hat.The adsorbent must be an inert, alkaline, granular material which tends to reject bupulone and which has a high affinity for humulone and has no effect on beer.

Das bevorzugte Material ist natürliches oder synthetisches Calciumsilikat, aber es werden auch mit basischem Aluminiumoxyd gute Ergebnisseerzielt. Das Hexan wird aus der Säule durch das Auslaufrohr 14 durch Regulierung des Ventils 14 mit einer Fliessgeschwindigkeit von etwa 5 ml pro Minute und unter einem C02-Druck von ( 4 bis 5 psig ) 0,28 - 0,35 atü abgelassen bis die Flüssigkeitsoberfläche den oberen Teil des Bettes vom Adsorptionsmaterial erreicht hatte. In die so vorbereitete Säule wurde durch Öffnen des Ventils 12 der Hexanextrakt des Hopfen in die Säule 13 gegeben, wobei das Material mit einer Geschwin digkeit von 5 ml pro Minute zugegeben und eluiert wurde, wenn es in den folgenden Beispielen nicht anders angegeben ist.The preferred material is natural or synthetic calcium silicate, but there are also basic alumina achieves good results. The hexane is removed from the column through the outlet pipe 14 by regulating the valve 14 with a flow rate of about 5 ml per minute and under a CO2 pressure drained from (4 to 5 psig) 0.28-0.35 atmospheres until the liquid surface is below the surface had reached the upper part of the bed of adsorbent material. In the one so prepared Column was by opening valve 12 the hexane extract of the hops into the column 13, the material being added at a rate of 5 ml per minute and was eluted unless otherwise indicated in the following examples.

Der Auslauf aus dem Rohr 14 wurde in einem 1 Liter-Kolben gesammelt und die Elution der Säule fortgesetzt, bis das Adsorbens vollständig mit Humulon-Komplex beladen war. Diese Kapazität war erreicht, wenn die Front des Humulon-Komplexes den Elutionspunkt erreichte. Das Vorhandensein des Humulon-Komplexes konnte auf spektralanalytischem Wege erkannt werden.The effluent from tube 14 was collected in a 1 liter flask and the elution of the column continued until the adsorbent was completely complexed with humulone was loaded. This capacity was reached when the front of the humulone complex reached the elution point. The presence of the humulone complex could on can be recognized by spectral analysis.

Die Fliessgeschwindigkeit durch die Säule 13 muss in Athängigkeit von der besonderen Konzentration des Hopfenextraktes und in Abhängigkeit von den Abmessungen der Säule festgelegt werden, 80 dass der grösste Teil des Humulons aus dem Hopfen trakt entfernt wird, ehe dieser die Säule verlässt. Es ist natürloch wünschenswert, praktisch das gesamte Humulon zu entfernen. Die quantitativen Ergebnisse der frontalen Arbeitsweise an verschiedenen Adsorptionsmitteln werden in den folgenden Beispielen unter Anwendung eines Hexanextraktes von Hopfen mit einer Konzentration von 4 % gelösten Feststoffen aufgezeigt: Beispiel 1 18,77 g synthetisches Calciumsilikat ( Johns Manville's flMicro Cel"C" ) mit den Analysenwerten 27,8 % CaO und 49,5 % SiO2 wurden als Adsorbens 15 für die Säule verwendet. Die Abmessungen der Säule waren etwa 25,4 cm in der Höhe mit einem Durchmesser von 22 mm, das Adsorbens hatte einen pH-Wert von 9,8 ( 10 % Feststoffe in Wasser ). In dem Vorratsbehälter befanden sich 800 ml Hopfenextrakt unter einem solchen COo -Druck, der eine Fliessgeschwindigkeit von 4,5 ml pro Minute bewirkte. Der Hopfenextrakt enthielt 5172 mg Humulon und 3320 mg Lupulon.The flow rate through the column 13 must be dependent on the particular concentration of the hop extract and depending on the Dimensions of the column are set 80 that most of the humulone is made up is removed from the hop tract before it leaves the column. It's natural hole desirable to remove practically all of the humulone. The quantitative results the frontal operation on various adsorbents will be discussed in the following Examples using a hexane extract of hops with one concentration of 4% dissolved solids shown: Example 1 18.77 g of synthetic calcium silicate (Johns Manville's flMicro Cel "C") with the analysis values 27.8% CaO and 49.5% SiO2 were used as adsorbent 15 for the column. The dimensions of the column were about 25.4 cm in height by 22 mm in diameter, the adsorbent was a pH of 9.8 (10% solids in water). Located in the storage container 800 ml of hop extract under such a COo pressure that one Caused a flow rate of 4.5 ml per minute. The hops extract contained 5172 mg humulone and 3320 mg lupulone.

Das aus Leitung 14 ausgeflossene Material zeigte bei der Analyse 3285 mg Lupulon und 853 mg Humulon, so dass bewiesen ist, dass praktisch das gesamte Lupulon durch die Säule hindurchgeflossen ist. Es wurden 4319mg oder etwa 83,3 4 Humulon und nur 45 mg oder 1,3 % Lupulon in der Säule festgehalten. Es wurden 294 mg/g Humulon adsorbiert.The material drained from line 14 showed 3285 when analyzed mg of lupulone and 853 mg of humulone, so it has been proven that practically all of it Lupulone has flowed through the column. It got 4319mg or about 83.3 4 Humulone and only 45 mg or 1.3% lupulone retained in the column. There were 294 mg / g humulone adsorbed.

Beispiel 2 66,1 g basisches Aluminiumoxid dienten als Adsorbens 15 in der Säule. Das Adsorbens hatte einen pH-Wert von 10 (10 ffi Feststoffe in Wasser ). In dem Vorratsbehälter waren 500 ml Hopfenextrakt unter einem geeigneten C02-Druck. Das einzufüllende Material enthielt 2333 mg Humulon und 900 mg Lupulon. Die Analyse des aus der Leitung 14 ausgeflossenen Materials ergab 805 mg Lupulon und 88 mg Humulon, so dass bewiesen ist, dass praktisch das gesamte Lupulon durch die Säule hindurchgeflossen ist. In der Säule sind 2245 mg oder etwa 96,2 ß des Humulons und nur 95 mg oder 4,1 % des Lupulons festgehalten worden.Example 2 66.1 g of basic aluminum oxide served as adsorbent 15 in the column. The adsorbent had a pH of 10 (10 ffi solids in water ). In the storage container there were 500 ml of hop extract under a suitable CO2 pressure. The material to be filled contained 2333 mg humulone and 900 mg lupulone. The analysis of the material which flowed out of line 14 gave 805 mg of lupulone and 88 mg of humulone, so that it is proven that practically all of the lupulone flowed through the column is. In the column are 2245 mg or about 96.2 ß of the humulone and only 95 mg or 4.1% of the lupulon has been arrested.

Es sind also 24,1 mg/g Humulon adsorbiert worden.So 24.1 mg / g humulone have been adsorbed.

Beispiel 3 18,0 g synthetisches Calciumsilikat ( Johns Manvillets 11Micro Cel C" ) mit den Analysenwerten 27,8 % CaO und 49,5 % SiO2 wurden als Adsorbens 15 für die Säule verwendet ( bezogen auf das Schema ). Die Abmessungen der Säule waren 24,1 x 2,2 cm, das Adsorbens hatte einen pH-Wert von 9,8 ( 10 % Feststoffe in Wasser ). In dem Vorratsbehälter befanden sich 900 ml Hopfen extrakt unter einem CO2-Druck von ( 4 psig ) 0,28 atü, so dass eine Fliesysgeschwindigkeit von 5 ml pro Minute bewirkt wurde.Example 3 18.0 g of synthetic calcium silicate (Johns Manvillets 11Micro Cel C ") with the analysis values 27.8% CaO and 49.5% SiO2 were used as an adsorbent 15 used for the column (based on the scheme). The dimensions of the column was 24.1 x 2.2 cm, the adsorbent had a pH of 9.8 (10% solids in water ). In the storage container there were 900 ml of hops extract under one CO2 pressure of (4 psig) 0.28 atm, so that a flow rate of 5 ml per minute was effected.

Der Hopfenextrakt enthielt 5458 mg Humulon und 3595 mg Lupulon.The hop extract contained 5458 mg humulone and 3595 mg lupulone.

Das aus Leitung 14 ausgeflossene Material zeigte bei der Analyse 3278 mg Lupulon und 900 mg Humulon, so dass bewiesen ist, dass das meiste Lupulon durch die Säule hindurchgeflossen ist.The material drained from line 14 showed 3278 when analyzed mg of lupulone and 900 mg of humulone, so that it has been proven that most of it Lupulone has flowed through the column.

Es wurden 4558 mg oder 83,5 ß Humulon und nur 317 mg oder 8 t Lupulon in der Säule festgehalten. Es wurden 253 mg/g Humulon adsorbiert.There were 4558 mg or 83.5 ß of humulone and only 317 mg or 8 t of lupulone held in the column. 253 mg / g humulone were adsorbed.

Beispiel 4 18,0 g synthetisches Calciumsilikat ( Johns Manville's "Micro Cel C" ) mit den Analysenwerten 27,8 % CaO und 49,5 % SiO2 wurden als Adsorbens 15 für die Säule verwendet ( bezogen auf das Schema ). Die Abmessungen der Säule waren 24,8 x 2,2 cm, das Adsorbens hatte einen pH-Wert von 9,8 ( 10 % Feststoffe in Wasser ). In dem Vorratsbehälter befanden sich 900 ml Hopfen extrakt unter einem CO2 -Druck von ( 2 psig ) 0,14 atü, so dass eine Fliessgeschwindigkeit von 2,5 ml pro Minute bewirkt wurde.Example 4 18.0 grams of synthetic calcium silicate (Johns Manville's "Micro Cel C") with the analysis values 27.8% CaO and 49.5% SiO2 were used as an adsorbent 15 used for the column (based on the scheme). The dimensions of the column was 24.8 x 2.2 cm, the adsorbent had a pH of 9.8 (10% solids in water ). In the storage container there were 900 ml of hops extract under one CO2 pressure of (2 psig) 0.14 atm, so that a flow rate of 2.5 ml per minute was effected.

Der Hopfenextrakt enthielt 5598 mg Humulon und 3244 mg Lupulon.The hop extract contained 5598 mg humulone and 3244 mg lupulone.

Das aus Leitung 14 ausgeflossene Material zeigte bei der Analyse 2803 mg Lupulon und 1030 mg Humulon. Es wurden 4568 mg oder 82 ß Humulon und nur 441 mg oder 13 % Lupulon in der Säule festgehalten. Es wurden 254 mg/g Humulon adsorbiert.The material drained from line 14 showed 2803 when analyzed mg lupulone and 1030 mg humulone. There were 4568 mg or 82 ß humulone and only 441 mg or 13% lupulone retained in the column. 254 mg / g humulone were adsorbed.

Beispiel 5 20 g synthetisches Calciumsilikat ( Johns Manville's "Micro Cel C" ) mit den Analysenwerten 27,8 % CaO und 49,5 % SiO2 wurden als Adsorbens 15 für dieSäule verwendet ( bezogen auf das Sche-| ma ). Die Abmessungen der Säule waren 26,6 x 2,2 cm, das Adsorbens hatte einen pH-Wert von 9,8 ( 10 % Feststoffe in Wasser|).Example 5 20 grams of synthetic calcium silicate (Johns Manville's "Micro Cel C ") with the analysis values 27.8% CaO and 49.5% SiO2 were used as an adsorbent 15 is used for the column (based on the scheme). The dimensions of the column were 26.6 x 2.2 cm, the adsorbent had a pH of 9.8 (10% solids in water |).

In dem Vorratebehälter befanden sich 900 ml Hopfenextrakt unter einem CO-Druck von ( 8 psig ) 0,56 atü, so dass eine Fliessgeschwindigkeit von 10 ml pro Minute bewirkt wurde. Das zugefUhrte Material enthielt 7350 mg Humulon und 4302 mg Lupulon. Das aus Leitung 14 ausgeflossene Material zeigte bei der Analyse 2818 mg Humulon und 4122 mg Lupulon Es wurden 4532 mg oder 61,8 % Humulon und nur 180 mg oder 4,1 % Lupulon in der Säule festgehalten. Es wurden 227 mg/g Humulon absorbiert.In the storage container there were 900 ml of hop extract under one CO pressure of (8 psig) 0.56 atm, so that a flow rate of 10 ml per Minute was effected. The supplied material contained 7350 mg humulone and 4302 mg mg of lupulone. The material drained from line 14 showed 2818 when analyzed mg humulone and 4122 mg lupulone There were 4532 mg or 61.8% humulone and only 180 mg or 4.1% lupulone retained in the column. 227 mg / g humulone were absorbed.

Beispiel 6 9 g Calciumsilikat ( Fisher Chemical Co. ) mit den Analysenwerten 47.3 % .CaO und 51,7 % SiO2 wurden als Adsorbens 15 in der Säule verwendet. Die Abmessungen der Säule waren 8,9 x 2,2 cm, das Adsorbens hatte einen pH-Wert von 9,7 ( 10 % Fest-Stoff in Wasser ). In dem Vorratsbehälter befanden sich 150 ml Hopfenextrakt unter einem CO2-Druck von ( 3 psig ) 0,21 atü, so dass eine Fliessgeschwindigkeit von 5 ml pro Minuten erreicht wurde. Das zugeführte Material enthielt 1875 mg Humulon und 593 mg Lupulon. Das aus Leitung 14 ausgeflossene Material zeigte bei der Analyse 82 mg Humulon und 543 mg Lupulon, so dass bewiesen ist, dass das meiste Lupulon durch die Säule hindurch geflossen ist. Es wurden 1793 mg oder 96 % Humulon und nur 50 Ing oder 8 % Lupulon in der Säule festgehalten. Es wurden 199 mg/g Lupulon adsorbiert.Example 6 9 g calcium silicate (Fisher Chemical Co.) with the analytical values 47.3% CaO and 51.7% SiO2 were used as adsorbent 15 in the column. the Dimensions of the column were 8.9 x 2.2 cm, the adsorbent had a pH of 9.7 (10% solids in water). There were 150 ml of hop extract in the storage container under a CO2 pressure of (3 psig) 0.21 atm, so that a flow rate of 5 ml per minute was achieved. The supplied material contained 1875 mg humulone and 593 mg of lupulone. The material drained from line 14 showed upon analysis 82 mg humulone and 543 mg lupulone, so it has been proven that most of the lupulone has flowed through the column. There were 1793 mg or 96% humulone and only 50 ing or 8% lupulone retained in the column. There were 199 mg / g lupulone adsorbed.

Beispiel 7 20 g synthetisches Calciumsilikat ( Johns Manville's "Micro Cel Er ) mit den Analysenwerten 22,6 % CaO und 52,9 % SiO2 wurden als Adsorbens 15 für die Säule verwendet. Die Abmessungen der Säule waren 15,9 x 2,2 cm, das Adsbens hatte einen pH;Wert von 9,1 ( 10 % Feststoffe in Wasser ). In dem Vorratsbehälter befanden sich 600 ml Hopfenextrakt unter einem CO2-' Druck von ( 3 psig ) 0,21 atü, so dass eine Fliessgeschwindigkeit von 5 ml pro Minute bewirkt wurde. Das zugeführte Material mg enthielt 4914 mg Humulon und 2604 Lupulon. Das aus der Leitung 14 ausgeflossene Material zeigt bei der Analyse 492 mg Humulon und 2498 mg Lupulon, so dass bewiesen ist, dass das meiste Lupulon durch die Säule hindurchgeflossen ist. Es wurden 4492 mg oder 90,0 % Humulon und nur 106 mg oder 4,0 % Lupulon in der Säule festgehalten. Es wurden 221 mg/g Humulon adsorbiert.Example 7 20 g of synthetic calcium silicate (Johns Manville's "Micro Cel Er) with the analysis values 22.6% CaO and 52.9% SiO2 were used as adsorbents 15 used for the column. The dimensions of the column were 15.9 x 2.2 cm, the adsbens had a pH of 9.1 (10% solids in water). In the storage container 600 ml of hop extract were under a CO2 pressure of (3 psig) 0.21 atmospheres, so that a flow rate of 5 ml per minute was effected. The supplied Material mg contained 4914 mg humulone and 2604 mg lupulone. That which has flowed out of the line 14 When analyzed, material shows 492 mg humulone and 2498 mg lupulone, so that is proven is that most of the lupulone has passed through the column. There were 4492 mg or 90.0% humulone and only 106 mg or 4.0% lupulone held in the column. 221 mg / g humulone were adsorbed.

Beispiel 8 20 g synthetisches Calciumsilikat ( Johns Manville's nMicro Cel T-49" ) mit dem AnaIysenwert von etwa 45 % CaO wurde als Adsorbens 15 für die Säule verwendet. Die Abmessungen des Bettes waren 20,3 x 2,2 cm; das Adsorbens hatte einen pH-Wert von 11,3 ( 10 % Feststoffe in Wasser ). In dem Vorratsbehälter befanden sich 500 ml Hopfenextrakt unter einem CO2-Druck von ( 5 psig ) 0,35 atü, so dass eine Fliessgeschwindigkeit von 5 ml pro Minute bewirkt wurde. Das zugeführte Material enthielt 4533 mg Humulon und 1685 mg Lupulon. Das aus Leitung 14 ausgeflossene Material zeigte bei der Analyse 419 mg Hwnulon und 1540 mg Lupulon, so dass bewiesen ist, dass das meiste Lupulon durch die Säule hindurchgeflossen ist. Es wurden 4114 mg oder 90,8 ffi Humulon und nur 145 mg oder 8,6 % Lupulon in der Säule festgehalten. Es wurden 206 mg/g Humulon adsorbiert.Example 8 20 g of synthetic calcium silicate (Johns Manville's nMicro Cel T-49 ") with the analysis value of about 45% CaO was used as adsorbent 15 for the column used. The dimensions of the bed were 20.3 x 2.2 cm; the adsorbent had one pH 11.3 (10% solids in water). Located in the storage container 500 ml of hops extract under a CO2 pressure of (5 psig) 0.35 atmospheres, so that a flow rate of 5 ml per minute was effected. The supplied material contained 4533 mg humulone and 1685 mg lupulone. The material that has flowed out of line 14 showed in the analysis 419 mg Hwnulon and 1540 mg Lupulon, so that it is proven that most of the lupulone has flowed through the column. There were 4114 mg or 90.8 ffi humulone and only 145 mg or 8.6% lupulone retained in the column. 206 mg / g humulone were adsorbed.

Beispiel 9 20 g Calciumsilikat ( Fisher Chemical Company ) mit den Analysenwerten 47,3 % CaO und 51,7 % SiO2 wurden als Adsorbens 15 für die Säule verwendet. Die Abmessungen des Bettes waren 21,6 x 2,2 cm, das Adsorbens hatte einen pH-Wert von 9,7 (10 % Feststoffe in Wasser ). In dem Vorratsbehälter befanden sich 600 ml Hopfenextrakt unter einem C02-Druck von ( 7 pslg ) 0,49 atü, so dass eine Fliessgeschwindigkeit von 5 ml pro Minute bewirkt wurde. Das zugeführte Material enthielt 5322 mg Humulon und 2832 mg Lupulon. Das aus Leitung 14 ausgeflossene Material zeigte bei der Analyse 150 mg Humulon und 2728 mg Lupulon, so dass bewesien ist, dass das meiste Lupulon durch die Säule hindurchgeflossen ist. Es wurden 5172 mg oder 97,1 % des Humulons und nur 104 mg oder 3,6 % des Lupulons in der Säule festgehalten. Es wurden 259 mg/g Humulon adsorbiert.Example 9 20 g calcium silicate (Fisher Chemical Company) with the Analysis values 47.3% CaO and 51.7% SiO2 were used as adsorbent 15 for the column used. The dimensions of the bed were 21.6 x 2.2 cm, the adsorbent had one pH 9.7 (10% solids in water). There were in the storage container 600 ml of hops extract under a CO2 pressure of (7 pslg) 0.49 atm, so that a Flow rate of 5 ml per minute was effected. The supplied material contained 5322 mg humulone and 2832 mg lupulone. The material that has flowed out of line 14 the analysis showed 150 mg humulone and 2728 mg lupulone, so that it is that most of the lupulone has flowed through the column. There were 5172 mg or 97.1% of the humulone and only 104 mg or 3.6% of the lupulone retained in the column. 259 mg / g humulone were adsorbed.

Beispiel 10 20 g gereinigtes Calciumsilikat ( Fisher Chemical Co.) mit den Analysenwerten von 47,3 % CaO und 51,7 % SiO2 wurden als Adsorbens 15 für die Säule verwendet. Die Abmessungen des Bettes waren 21,6 x 2,2 om, das Adsorbens hatte einen pH-Wert von 9,7; ( 10 % Feststoffe in Wasser ). In dem Vorratsbehälter befanden sich 500 ml Hexanextrakt von ganzen getrocknetem Hopfen unter einem C02-Druck von ( 4 psig ) 0,28 atü, Das zugeführte, Material enthielt 3785 mg Humulon und 925 mg Lupulon. Das aus Leitung 14 ausgelossene Material zeigte bei der Analyse 169 mg Humulon und 1058 mg Lupulon. Es wurden 3616 mg Humulon in der Säule zurUckbehalten und es ist praktisch das ganze Lupulon hindurchgeflossen.Example 10 20 g of purified calcium silicate (Fisher Chemical Co.) with the analysis values of 47.3% CaO and 51.7% SiO2 were used as adsorbent 15 for the column used. The dimensions of the bed were 21.6 x 2.2 om, the adsorbent had a pH of 9.7; (10% solids in water). In the storage container contained 500 ml of hexane extract from whole dried hops under a CO2 pressure of (4 psig) 0.28 atmospheres, the feed contained material 3785 mg humulone and 925 mg lupulone. The material discharged from line 14 showed in the analysis 169 mg humulone and 1058 mg lupulone. There were 3616 mg of humulone in the column and practically all of the lupulone has flowed through it.

Beispiel 11 Die Humulone wurden von den Lupulonen durch ein frontales chromatographisches Elutionsverfahren in einem Dichlormethanextrakt von Hopfen auf einer Säule aus synthetischem Magnesiumsilikat isoliert.Example 11 The humulones were separated from the lupulones through a frontal chromatographic elution process in a dichloromethane extract of hops a column of synthetic magnesium silicate isolated.

Beispiel 12 Um zu zeigen, dass das alkalische körnige Adsorptionsmaterial der Säule mit Diatomeenerde verdünnt werden kann, wurden Humulone von Lupulonen in einem Hexanextrakt von Hopfen unter Anwendung der frontalen Elutionstechnik, wie soeben beschrieben, auf einer Sa"ule isoliert, die zu 50 ffi aus Calciumoxid und 50 % aus Diatomeenerde bestand.Example 12 To show that the alkaline granular adsorbent material the column can be diluted with diatomaceous earth, humulones were made from lupulones in a hexane extract of hops using the frontal elution technique, as just described, isolated on a column of calcium oxide and 50% was diatomaceous earth.

Beispiel 13 Ein hydrierter Hexanextrakt von Hopfen wurde nach dem Verfahrene der US-Patentschrift 3 079 262 hergestellt. Synthetisches Calciumsilikat ( Johns Manville's "Micro Cell C" ) wurde als Adsorbens 15 fürdie Säule verwendet. Das Adsorptionsmittel mit dem zurUckgehaltenen Tetrahydrohumulon wurde aus der Säule entfernt und ausserhalb in einer wässrigen Natriumcarbonatlösung isomerisiert. Das erhaltene Produkt kann entweder aus dem Adsorbens entfernt werden oder darauf belassen werden und in einer der vorher beschriebenen Weisen verwendet werden. Das Produkt hatte in Wasser einen bitteren Geschmack.Example 13 A hydrogenated hexane extract of hops was prepared according to the Method of U.S. Patent 3,079,262. Synthetic calcium silicate (Johns Manville's "Micro Cell C") was used as adsorbent 15 for the column. The adsorbent with the retained tetrahydrohumulone was removed from the column removed and isomerized outside in an aqueous sodium carbonate solution. That obtained product can either be removed from the adsorbent or left on it and used in any of the ways previously described. The product would have bitter taste in water.

Beispiel 14 Nach den hoher beschriebenen Verfahren wurden Trennungen auf einer Säule aus synthetischem Calciumsilikat durchgeführt, wobei als Lösungsmittelsysteme Hexan und 1 ß Methanol und Hexan und 5 % Aceton dienten. Es wurden gute Trennungen der Humulone von den Lupulonen erreicht.Example 14 Following the procedures described above, separations were made carried out on a column of synthetic calcium silicate, using as solvent systems Hexane and 1 ß methanol and hexane and 5% acetone were used. The breakups turned out to be good the humulones reached by the lupulones.

Abschnitt II Isomerisierung und Anwendung Der in der Säule zurückgehaltene Humulon-Komplex kann, nachdem das Verfahren des Abschnitts I beendet ist, auf verschiedene Weise verwendet werden. Es ist zunächst wünschenswert, das Lösungsmittel von dem Humulon-Komplex auf dem Adsorptionsmaterial auf geeignete^Weise zu entfernen, wie z.B. durch Trocknen oder Abstreifen. Dieses Abstreifen oder Trocknen kann entweder in der Säule erfolgen oder das Adsorptionsmaterial kann aus der Säule in einen Kolben oder einen anderen Behälter aber führt werden. Um den Humulon-Komplex zur weiteren Verwendung vorzubereiten, kann dieser zum Isohumulon-Komplex isomerisiert werden. Dies kann mit Hilfe von Wasserdampf zusammen mit dem Abstreifen des Lösungsmi ttels vom Adsorptionamaterial erfolgen, wobei dies Abstreifen entweder in der Säule oder in einem gesonderten Kolben geschehen kann. Die Isomerisierung kann auch durch Erhitzen des Humulon-Komplexes in Gegenwart von Wasser auf dem Adsorptionsmaterial in einem Ofen erfolgen. Die Isomerisierung kann auch erfolgen, indem der Humulonkomplex auf dem Adsorptionsmittel der Einwirkung von Mikrowellen in Gegenwart von Wasser ausgesetzt wird. Der Isohumulon-Komplex kann dem Braukessel oder einem der nachfolgenden Kessel im Brauverfahren zugeführt werden. In jedem Fall hat das besondere Adsorptionsmaterial keine nacteilige Wirkung auf das Bier und kann an einer der Endstufen des Brauverfahren abfiitr:!ert werden. Das Verfahren erlaubt auch, dass das isomerisierte adsorbierte Material von dem Adsorbens mit Hilfe von wässrigen Alkali oder Äthanol abgelaugt wird. Die erhaltene Lösung kann dem Brauverfahren an jeder beliebigen Stelle zugesetzt werden.Section II Isomerization and Use That retained in the column After the procedure of Section I is completed, humulone complex can be used in various Way to be used. It is first desirable to remove the solvent from the To remove the humulone complex on the adsorbent material in a suitable manner, such as e.g. by drying or wiping. This stripping or drying can either take place in the column or the adsorbent material can be transferred from the column into a flask or another container but leads. To the humulone complex for further To prepare for use, this can be isomerized to the isohumulone complex. This can be done with the help of steam together with the stripping of the solvent from the adsorption material, this being stripped either in the column or can be done in a separate flask. The isomerization can also be carried out by heating of the humulone complex in the presence of water on the adsorbent material in one Oven. The isomerization can also take place by adding the humulone complex to it exposed the adsorbent to the action of microwaves in the presence of water will. The isohumulone complex can be added to the brew kettle or one of the subsequent kettles be added in the brewing process. In each case, the special adsorption material has no nacteilige effect on the beer and can at one of the final stages of the brewing process abfiitr:! ert will. The process also allows the isomerized adsorbed material from the adsorbent with the help of aqueous alkali or ethanol is sucked off. The solution obtained can be applied to the brewing process at any arbitrary Place to be added.

Das neuartige Verfahren ermöglicht es vollkommen, den Humulon-Komplex auf dem Adsorptionsmaterial direkt an der Stelle hinzuzufügen, wo er gleichzeitig isomerisiert werden kann. In den folgenden Beispielen werden die Isomerisierung und die Anwendung des Humulon-Komplexes aufgezeigt, und in der beiliegenden Zeichnung dargestellt. The novel process makes it possible to completely remove the humulone complex to add on the adsorbent material right in the place where he was at the same time can be isomerized. The following examples are isomerization and the application of the humulone complex shown, and in the accompanying drawing shown.

Beispiel 1 Das Adsorptionsmaterial 15 mit dem darauf haftenden Humulon aus der Säule 13 ( bezogen auf die Zeichnung ) aus Beispiel 10, Abschnitt I, wurde in einen 1 Liter-Rundkolben 16 eingetragen, wie in der Zeichnung dargestellt. Es wurden einige Streifen aus rostfreiem Stahl hinzugefügt, Um eine Durchmischung ZU bewirken.Example 1 The adsorbent material 15 with the humulone adhering thereon from column 13 (based on the drawing) from Example 10, Section I, became entered in a 1 liter round bottom flask 16, as shown in the drawing. It Some stainless steel strips were added to allow for a thorough mixing cause.

In den Kolben 16 wurde dann Wasserdampf eingeleitet und dieser dabei unter den Bedingungen der Umgebung gedreht. In Abständen von 5 Minuten wurden aliquote Anteile zur spektrophotometrisehen Untersuchung abgenommen. Die Probe nach 10 Minuten zeigt teO das die Isomerisierung des Humulons vollständig verlaufen war. Die Analyse der pulverisierten Feststoffe nach 15 Minuten der Wasserdampfbehandlung zeigte 3540 mg Isohumulon-Verbindungen, 1998 mg andere Feststoffe und 20 g trockenes Pulver. Steam was then passed into the flask 16 and this at the same time rotated under the conditions of the environment. Aliquots were made at 5 minute intervals Parts removed for spectrophotometric examination. The sample after 10 minutes teO shows that the isomerization of the humulone was complete. The analysis the powdered solids after 15 minutes of steaming showed 3540 mg of isohumulone compounds, 1998 mg of other solids, and 20 g of dry powder.

Beispiel 2 0,65 g des Füllmaterjais 15 der Säule aus Beispiel 10, Abschnitt 1, wurde aus der Säule herausgenommen, wie in der Zeichnung unter 17 dargestellt. Es wurde dann wie unter 18 angegeben, getrocknet und vom Lösungsmittel befreit. Das Ma- . Example 2 0.65 g of the filling material 15 of the column from Example 10, Section 1 has been removed from the column as shown in the drawing under 17. It was then as indicated under 18, dried and freed from the solvent. The Ma-.

terial, das 124 mg Humulon je Gramm Adsorptionsmittel enthielt, wurde dann in einen 1 Liter-Kolben mit WUrze von 11,6°B gegeben. Der Zusatz zur Würze entsprach einem Äquivalent von 80,6 ppm Humulon. Die Kürze wurde 90 Minuten lang gekocht und enthielt danach 47,3 ppm Isohumulon. D.h., dass 58,7 % des zugesetzten Humulons in der gekochten Würze als Isohumulon gefunden wurden. Das zeigt, dass das getrocknete Materie der Säule eine bestimmte Verwendbarkeit hat, wenn es dem Braukessel, wie bei 19 in der Zeichnung, zugesetzt wird. Die Humulone können auch wie bei 18', ausgelaugt werden und dann dem Braukessel wie bei 19 zugesetzt werden. material containing 124 mg humulone per gram of adsorbent, became then placed in a 1 liter flask with a wort of 11.6 ° B. The addition to the seasoning corresponded to an equivalent of 80.6 ppm humulone. The brevity became 90 minutes cooked and then contained 47.3 ppm isohumulone. That means that 58.7% of the added Humulons were found in the cooked condiment as isohumulone. It shows that the dried matter of the column has a definite usefulness when it is the Brew kettle, as at 19 in the drawing, is added. The humulones can too as at 18 ', and then added to the brew kettle as at 19.

Beispiel 3 10 g des Adsorptionsmaterials 15 aus Beispiel 10, Abschnitt I, wurden im Vakuum vom Lösungsmittel, wie bei 20 im Schema, befreit. Es wurde dann mit etwa 25 ml Wasser angeteigt und in einem Ofen etwa 30 Minuten lang auf 950 C erhitzt, um das Humulon wie bei 21 im Schema, zu isomerisieren. Der erhaltene Brei wurde dann wiederum im Vakuum getrocknet und für die folgenden Beispiele verwendet: A. 0,4374 g des Säulenmaterials, das 114 mg Isohumulon Je Gramm Feststoffe enthielt, wurde einem Liter Würze von 11,6°B am Anfang einer 90-minütigen Kochzeit im Kessel zugesetzt, wie unter 22 angegeben. In diesem Beispiel wurden 49,9 ppm Isohumulon hinzugefügt und die Würze enthielt am Ende ("knockout") noch 34,4 ppm Isohumulon. Dies zeigt, dass 68,9 ffi des Isohumulons verwertet werden im Vergleich zu einer Verwertung von 20 - 35 % in den üblichen Verfahren, in denen Hopfen dem Braukessel zugesetzt wird.Example 3 10 g of the adsorption material 15 from Example 10, section I, were freed from the solvent in vacuo, as at 20 in the scheme. It then became Make a paste with about 25 ml of water and bake in an oven at 950 C for about 30 minutes heated to isomerize the humulone as at 21 in the scheme. The obtained porridge was then again dried in vacuo and used for the following examples: A. 0.4374 g of the column material containing 114 mg of isohumulone per gram of solids, became one liter of wort of 11.6 ° B at the beginning of a 90-minute boiling time in the kettle added as indicated under 22. In this example there was 49.9 ppm isohumulone added and the wort still contained 34.4 ppm isohumulone at the end ("knockout"). This shows that 68.9 ffi of the isohumulone are recovered compared to one Utilization of 20 - 35% in the usual processes in which hops are added to the brewing kettle is added.

B. Eine gleiche Menge Adsorptionsmaterial, die den gleichen Anteil Isohumulon Je Gramm enthielt, wurde jeweils einem Liter WUrze 15 Minuten vor Beendigung ("knockout") des Prozesses zugesetzt, wie unter 22 im Schema. In diesem Fal wurden 49,9 ppm Isohumulon hinzugefügt und 34,0 ppm lagen am Ende noch vor, das entspricht einer Verwertung von 68,1%.B. An equal amount of adsorbent material containing the same proportion Isohumulon per gram contained one liter of wort 15 minutes before completion ("knockout") of the process, as under 22 in the scheme. In this case became 49.9 ppm isohumulone added and 34.0 ppm was still present at the end, which corresponds to a recovery of 68.1%.

Diese Beispiele zeigen daher die ausgezeichnete Verwertbarkeit der Isohumulone im Brauverfahren, die nach dem verbesserten chromatographischen Verfahren hergestellt worden sind. These examples therefore show the excellent usability of the Isohumulones in the brewing process, which is made according to the improved chromatographic process have been manufactured.

Beispiel 4 Mit Hilfe einer chromatographischen Säulentrennung auf synthetischem Calciumsilikat ( Johns Manville's "Micro Cel C" ), bei dem das Säulenmaterial 15 15Q mg Isohumulon Je Gramm Feststoffe enthielt, wurden Lösungen des Isohumulons hergestellt. Etwa 0,7 g des Säulenmaterials, das Isohumulon enthielt; wurden mit 25 ml von 0,02 N-NaOR oder Athanol ausgelaugt, entsprechend 24 im Schema. Aus den Lösungen wurde das Adsorptionsmaterial abfiltriert.Example 4 With the aid of a chromatographic column separation synthetic calcium silicate (Johns Manville's "Micro Cel C"), in which the column material 15 mg of isohumulone per gram of solids were solutions of the isohumulone manufactured. About 0.7 g of the column material containing isohumulone; were with 25 ml of 0.02 N-NaOR or ethanol leached, corresponding to 24 in the scheme. From the Solutions, the adsorption material was filtered off.

Geeignete aliquote Anteile für die in der folgenden Tabelle angegebenen Konzentrationen des Isohumulons wurden dem ungehopften fertigen Bier wie bei 25 im Schema, zugesetzt: Probe Lösungsmittel- zugesetztes Isohumulon Verwertsystem Isohumulon im Produkt barkeit ppm ppm % Micro Cel C mit 0,02 N-NaOH ausgelaugt 18,7 15,6 83,4 " " 37,4 32,8 87,7 " mit Äthanol ausgelaugt 19,9 19,2 96,5 " " 40,1 38,9 97 Die Biere wurden verkostet und es wurde festgestellt, dass sie die durch das isohumulon bedingte charakteristische Bitterkeit aufweisen.Appropriate aliquots for those indicated in the table below Concentrations of isohumulone were added to the unhopped finished beer as at 25 in the scheme, added: sample solvent- added isohumulone recovery system Isohumulone in the product availability ppm ppm% Micro Cel C with 0.02 N-NaOH leached 18.7 15.6 83.4 "" 37.4 32.8 87.7 "Ethanol leached 19.9 19.2 96.5" "40.1 38.9 97 The beers were tasted and found to have been produced by the show characteristic bitterness caused by isohumulone.

Beispiel 5 Synthetisches Calciumsilikat-Adsorbens 15, das 95,3 mg Isoverbindungen je Gramm Feststoffe enthielt,wurde aus der Säule hrausgenommen, vom Lösungsmittel befreit wie bei 20, isomerisiert wie bei 21, und in verschiedenen Anteilen dem entcarbonisierten, fertigen, ungehopften Bier wie bei 23 zugesetzt.Example 5 Synthetic Calcium Silicate Adsorbent 15 Containing 95.3 mg Isocompounds per gram of solids was removed from the column except, freed from solvent as in 20, isomerized as in 21, and in different proportions the decarbonized, finished, unhopped beer such as added at 23.

Das Bier wurde 20 Minuten lang gerUhrt, 30 Minuten lang stehen gelassen und zur Entfernung des ausgelaugten Pulvers filtriert.The beer was stirred for 20 minutes, allowed to stand for 30 minutes and filtered to remove the leached powder.

Die Ergebnisse waren die folgenden: Adsorbens mit Zugesetztes Isohumulon Gefundenes Auf O-Probe Isohumulon Isohumulon theoretisch Isohumulon korrigiert mg mg ppm ppm 0 0 0 3,0 10,4 0,099 9,9 7,3 43,4 20,0 0,191 19,1 11,3 43,4 30,0 o,286 28,6 15,3 43,o 60,7 0,578 57,8 26,o 39,8 100,9 0,957 95,7 37,2 35,7 Beispiel 6 Synthetisches Calciumsilikat, das nach Beispiel 10, Abschnitt erhaltenes Humulon enthielt, wurde aus der Säule 13 nach der Elution entfernt und bei Raumtemperatur und 1-2" Hg ABS eineinhalb Stunden lang wie bei 27 getrocknet. Die Analyse des entwickelten Adsorbers ergab 0,8 ß flüchtige Bestandteile, 10 % Humulon und 6,9 % Isoverbindungen. Durch Zusatz von Wasser wurde der Feuchtigkeitsgehalt auf 33 ffi erhöht. Aliquote Anteile des Materials wurden in Versuchsröhrchen von 2,54 cm Durchmesser gebracht. Die Röhrchen wurden in einem elektrischen Ofen vom Typ Tappan, Modell R4L A206, 8,8 KW, 2450 Kilohertz zur verschiedene lange Zeiten dem Einfluss von Mikrowellen ausgesetzt, wie bei 28. Die abgekühlten Proben wurden auf Humuion und Isohumulon untersucht, wobei jeweils Mengen von 100 -200 mg abgewogen, mit 5 ml Methanol angeteigt, davon 0,10 mi des klaren Überstandes abgenommen und mit alkalischem Methanol auf 10 ml verdünnt, die Adsorption bei 255 und 360 m/u gemessen und nach dem Verfahren von Rigby und Bars ( Proc. A.S.B.C., 1961, S. 46-50 ), berechnet wurden. Die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengesellt: Probe Erwärmungs- Tempera- Feuchtig- Berechnet auf einer Nr. zeit tur C keit Grundlage von 0,8 % Feuchtigkeit % Humulon % Isoverb.The results were as follows: Adsorbent with Added Isohumulone Isohumulon found on O-sample isohumulon theoretically isohumulon corrected mg mg ppm ppm 0 0 0 3.0 10.4 0.099 9.9 7.3 43.4 20.0 0.191 19.1 11.3 43.4 30.0 o, 286 28.6 15.3 43, o 60.7 0.578 57.8 26, o 39.8 100.9 0.957 95.7 37.2 35.7 Example 6 Synthetic Calcium silicate containing humulone obtained according to Example 10, section removed from column 13 after elution and stored at room temperature and 1-2 "Hg ABS Dried for an hour and a half as at 27. Analysis of the developed adsorber yielded 0.8 ß volatile constituents, 10% humulone and 6.9% iso compounds. By The addition of water increased the moisture content to 33 ffi. Aliquots the material was placed in test tubes 2.54 cm in diameter. The tubes were in an electric oven of the Tappan type, model R4L A206, 8.8 KW, 2450 Kilohertz exposed to the influence of microwaves for various long times, as in 28. The cooled samples were examined for humuion and isohumulon, in each case quantities of 100-200 mg weighed out, made into a paste with 5 ml of methanol, thereof 0.10 ml of the clear supernatant removed and washed with alkaline methanol on Diluted 10 ml, measured the adsorption at 255 and 360 m / u and according to the procedure by Rigby and Bars (Proc. A.S.B.C., 1961, pp. 46-50). The results are summarized in the following table: Sample warming temperature humid Calculated on a no time basis of 0.8% moisture% humulone % Isoverb.

0 0 Min. 0,8 10,0 6,9 1 1 66 33,3 4,8 10,0 2 2 80 34,3 2,3 11,1 3 3 83 31,3 1,8 11,2 4 4 85 26,4 1,8 12,0 5 5 88 15,8 1,6 10,8 6 5 81 0,5 3,1 9,5 Danach ist es also möglich, die Isohumulone wie bei 29, auszulaugen und es dem Nachkessel ( Würzepfanne ) im Brauchverfahren zuzusetzen, wie bei 30, oder es direkt dem Brauverfahren, wie bei 31 oder 37, zuzufügen.0 0 min. 0.8 10.0 6.9 1 1 66 33.3 4.8 10.0 2 2 80 34.3 2.3 11.1 3 3 83 31.3 1.8 11.2 4 4 85 26.4 1.8 12.0 5 5 88 15.8 1.6 10.8 6 5 81 0.5 3.1 9.5 After that it is possible to leach out the isohumulones as with 29 and add it to the post-boiler (Wort kettle) to be added in the customary process, as with 30, or it directly to the brewing process, as at 31 or 37, to be added.

Beispiel 7 Anstatt das Säulenmaterial 15 in einen Kolben einzutragen, wie der Kolben 16 im Schema, kann das Lösungsmittel von dem Adsorbens mit Hilfe von Wasserdampf in situ entfernt werden, während das Adsorbens sich noch in der Säule befindet und der Wasserdampf gleichzeitig wie bei 32 isomerisiert wird. Danach kann das Säulenmaterial direkt dem Braukessel wie bei 33 oder dem Nachkessel wie bei 34 zugesetzt werden, oder das Isohumulon kann wie bei 35 ausgelaugt werden und wie bei 35 dem Nachkessel zu-;gesetzt werden Beispiel 8 In diesem Beispiel wurde die Isomerisierung der Humulone in dem Hopfenextrakt durchgefUhrt, bevor dieser Extrakt verwendet wurde, und die Isohumulone wurden anstelle der Humulone aus den Beispielen des Abschnittes I an dem Adsorptionsmittel zurückgehalten. Um dieses Verfahren durchzuführen, wurde der Hexan extrakt des Hqfens mit Natriumborhydrid reduziert, entsprechend dem Verfahren der US-Patentschrift 3 044 879, um eine Isomerisierung der Humulone im Extrakt zu bewirken. Der Extrakt wurde danach durch eine Adsorptionssäule geschickt und die Isohumulone von den Lupulonen mit Hilfe der frontalen Elutionstechnik unter Verwendung von synthetischem Calciumsilikat als Adsorptionsmittel getrennt. Mit diesem Verfahren werden die Isohumulone an das Adsorptionsmittel gebunden und sind verwendungs fähig. Während im allgemeinen zur Durchführung chromatögraphischer Verfahren absteigende Säulen ( gravity columns) verwendet werden und auch eine solche in dem Schema zur besseren Erläuterung dargestellt ist, muss betont werden, dass bei der Durchführung des Verfahrens der vorliegenden Erfindung das Elution mittel durch ein geeignetes Hilfsmittel veranlasst werden kann, durch einen Teil des Adsorptionsmaterials zu fliessen, der sich in jeder gewünschten Richtung befindet.Example 7 Instead of putting the column material 15 in a flask, like the piston 16 in the scheme, the solvent can be removed from the adsorbent with the aid be removed by water vapor in situ while the adsorbent is still in the Column is located and the water vapor is isomerized at the same time as at 32. Thereafter the column material can be transferred directly to the brew kettle as in 33 or to the post kettle as in be added at 34, or the isohumulone can be leached as at 35 and as in 35 to the post-boiler; Example 8 In this Example, the isomerization of the humulones in the hop extract was carried out, before this extract was used and the isohumulones were substituted for the humulones from the examples of Section I retained on the adsorbent. Around To carry out this procedure, the hexane was extracted from the Hqfens with sodium borohydride reduced by isomerization according to the method of US Pat. No. 3,044,879 effect of the humulones in the extract. The extract was then passed through an adsorption column sent and the isohumulones from the lupulones using the frontal elution technique separated using synthetic calcium silicate as an adsorbent. With this process, the isohumulones are bound to the adsorbent and are usable. While in general to carry out chromatographic Method descending columns (gravity columns) are used and also such is shown in the scheme for better explanation, it must be emphasized that in practicing the method of the present invention, the eluting agent can be caused by a suitable auxiliary means, by part of the adsorbent material to flow that is in any desired direction.

Es können verschiedene Veränderungen und Modifikationen vorgenommen werden, ohne vom Kern der Erfindung abzuweichen, und alle diese Veränderungen sind in dem Rahmen der Ansprüche enthalten.Various changes and modifications can be made without departing from the gist of the invention, and all of these changes are included in the scope of the claims.

Pa tentansprtlche: Patent claims:

Claims

Claims: 1. A method for separating and producing the Humulone complex for recovery, characterized in that with the help of a hydrocarbon a hop extract is produced as a solvent, which serves as an eluent and contains the material to be separated; that a column of inert, alkaline, granular adsorption material is precipitated, which repels lupulone and a high Has an affinity for humulone and calcium silicate, synthetic calcium silicate, synthetic magnesium silicate, basic aluminum oxide or a mixture of calcium oxide and can be diatomaceous earth; that the hop extract is continuously with such Speed is given to the adsorption column, depending on the dimensions the column and the concentration of the extract tes, so that a fratal chromatographic Separation takes place, and most of the humulone on the adsorbent material is recorded before the extract leaves the adsorption column and that the hop extract at the same time serves as an eluant because the humulone complex on the adsorbent material is continuously developed; that this feed is continued until the The adsorption capacity of the 9 utes for humulone is exhausted; that while the hops extract byc the column flows, in the finish lupulone, waxes and other insignificant Components are collected and that the solvent is then removed.

2. The method according to claim 1, characterized in that the adsorption material Calcium silicate or synthetic calcium silicate is.

3. The method according to claim 1, characterized in that the humulone complex is isomerized by the addition of moisture and energy while it is being turned located on the adsorbent material.

4. The method according to claim 1, characterized in that the humulone complex while on the adsorbent by the application of heat and Moisture is isomerized.

5. The method according to claim 1, characterized in that the humulone complex Water is added and it is isomerized using microwaves while it is located on the adsorbent material.

6. The method according to claim 1, characterized in that the solvent is removed from the adsorbent with the aid of steam and simultaneously the humulone complex is isomerized.

7. The method according to claim 6, characterized in that the removal of the solvent by steam and isomerization in the adsorption column take place.

8. Process for separating and utilizing the Humalon complex according to Claim 1, characterized in that the humulone is isomerized by the Adsorption material loaded with the humulone complex in the brewery of the hot Wort is added.

9. Process for separating and utilizing the humulone complex according to Claim 3, characterized in that the loaded with the isohumulone complex Adsorption material is added to the hot wort in the brewery.

10. Process for separating and utilizing the humulone complex according to Claim 3, characterized in that the loaded with the isohumulone complex Adsorbent in the brewery to which Nachkeasel is added.

11. The method according to claim 1, characterized in that the humulone Isomerized in the hop extract by reducing the extract with sodium borohydride before the extract flows through the adsorption column and that the isohumulone is retained on the adsorption material when the hop extract is on the column is given.

12. The method according to claim 1, characterized in that ala solvent Hydrocarbons, e.g.

Hexane, hexane with a small amount of methanol, hexane with a small amount Amount of acetone, pentane, heptane, octane, isooctane, chloro- | shape, carbon tetrachloride, Dichloromethane, dichloroethane, trichloroethane, tetrachloroethane, toluene, -lZnzol and Xylene.

L e r s e i t e